Targeting and cell uptake monitoring of biologics for cancer
Osmonen, Nora (2023)
Osmonen, Nora
2023
Julkaisu on tekijänoikeussäännösten alainen. Teosta voi lukea ja tulostaa henkilökohtaista käyttöä varten. Käyttö kaupallisiin tarkoituksiin on kielletty.
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi-fe2023051544522
https://urn.fi/URN:NBN:fi-fe2023051544522
Tiivistelmä
The surface plasmon resonance technique has recently been widely utilized in a wide range of biotechnological and microbiological applications. This masters’ thesis project is a collaboration between Åbo Akademi University and Orion Pharma. The aim of the project was to monitor the interactions between human ovarian adenocarcinoma cells (SK-OV-3), two different protein-based antibody drugs, and a negative control (IgG). The interactions were measured with a surface plasmon resonance instrument, and complementary measurements and controls were performed with confocal microscopy and LigandTracer instrument. Based on the measured signals, the surface plasmon resonance technique was assessed and elucidated to study whether the technique could be utilized for differentiating between the surface interaction and internalization of protein-based drugs.
The results from the surface plasmon resonance measurements show that the method did not give replicable results. The concentration differences are clearly seen in short injections (20 minutes), but not in longer injections (4 hours). The results from the LigandTracer measurements show that trastuzumab and cetuximab have stronger interactions with the SK-OV-3 cells than IgG. Confocal microscopy pictures reveal that trastuzumab has primarily surface interactions with the cells and cetuximab has fewer surface interactions and is primarily taken up by the cells. IgG has overall very weak interactions with the cells. Tekniken ytplasmonresonans (SPR) har nyligen använts i stor utsträckning för olika typer av bioteknologiska och mikrobiologiska tillämpningar. Det här examensarbetet är ett samarbete mellan Åbo Akademi och Orion Pharma. Syftet med projektet var att mäta interaktioner och växelverkan mellan humana adenokarcinomaceller (SK-OV-3), två olika proteinbaserade antikroppsläkemedel, samt en negativ kontroll (IgG). Interaktionerna mättes med ett ytplasmonresonans instrument och kompletterande mätningar och kontroller utfördes med konfokalmikroskopi och LigandTracer-instrument. Baserat på de uppmätta signalerna bedömde och belyste vi om tekniken ytplasmonresonans kunde användas för att upptäcka skillnaden mellan ytinteraktionen och internaliseringen av de proteinbaserade läkemedlen.
Resultaten från ytplasmonresonansmätningarna visar att metoden inte gav replikerbara resultat. Koncentrationsskillnaderna syns tydligt med korta injektioner (20 minuter), men inte med längre injektioner (4 timmar). Resultaten från LigandTracer-mätningarna visar att trastuzumab och cetuximab har starkare interaktioner med SK-OV-3-cellerna än IgG. Konfokalmikroskopibilder avslöjar att trastuzumab har främst ytinteraktioner med cellerna och cetuximab har mindre ytinteraktioner men tas primärt upp av cellerna. IgG har generellt sett mycket svaga interaktioner med cellerna.
The results from the surface plasmon resonance measurements show that the method did not give replicable results. The concentration differences are clearly seen in short injections (20 minutes), but not in longer injections (4 hours). The results from the LigandTracer measurements show that trastuzumab and cetuximab have stronger interactions with the SK-OV-3 cells than IgG. Confocal microscopy pictures reveal that trastuzumab has primarily surface interactions with the cells and cetuximab has fewer surface interactions and is primarily taken up by the cells. IgG has overall very weak interactions with the cells.
Resultaten från ytplasmonresonansmätningarna visar att metoden inte gav replikerbara resultat. Koncentrationsskillnaderna syns tydligt med korta injektioner (20 minuter), men inte med längre injektioner (4 timmar). Resultaten från LigandTracer-mätningarna visar att trastuzumab och cetuximab har starkare interaktioner med SK-OV-3-cellerna än IgG. Konfokalmikroskopibilder avslöjar att trastuzumab har främst ytinteraktioner med cellerna och cetuximab har mindre ytinteraktioner men tas primärt upp av cellerna. IgG har generellt sett mycket svaga interaktioner med cellerna.
Kokoelmat
- 317 Farmasia [19]